Ultrafiltratsiya trubasiga texnik xizmat ko'rsatish va foydalanish usuli

Ultrafiltratsiya trubasiga texnik xizmat ko'rsatish va foydalanish usuli

Ultrafiltratsiya trubkasi funktsiyasi:

1) konsentratsiya; 2) tuzsizlantirish; 3) buferni almashtirish; 4) Qisman tozalash ta'siriga ega.

1. Yangi ultrafiltratsiya trubkasi boshqa davolashsiz bevosita ishlatilishi mumkin;

2. Ultrafiltratsiya trubkasini yuqori haroratda sterilizatsiya qilish mumkin emas;

3. Konsentrlangan oqsilni almashtirishda ultrafiltratsiya naychasini davolash

Ultrafiltratsiya trubkasi qayta ishlatilishi mumkin. Uni 0.1M NaOHda 1-2soat davomida namlang, suv bilan yuving, so‘ngra konsentratsiyalash uchun ishlatilishi mumkin bo‘lgan santrifugada tegishli eritma (sterillangan suv yoki PBS) bilan 3 marta yuving. yangi protein;

4. Oddiy joylashtirilgan ultrafiltratsiya trubkasini davolash

Tez-tez ishlatiladigan ultrafiltratsiya trubkasi uchun uni 0, 1M NaOHda 1-2 soat davomida namlang, suv bilan yuving va sterillangan suvga soling. Filtrni membranani nam holatda saqlashga ishonch hosil qiling va bakteriyalar ko'payishini oldini oling;

5. Uzoq vaqt davomida joylashtirilgan ultrafiltratsiya trubkasini davolash

Agar ultrafiltratsiya trubkasi uzoq vaqt ishlatilmasa, uni 0.1M NaOHda 1-2 soat davomida namlang, suv bilan yuving va saqlash uchun 20 foizli etanolga soling. Filtrni membranani nam holatda saqlashga ishonch hosil qiling va bakteriyalar ko'payishini oldini oling;

6. Ultrafiltratsiya trubkasi uchun ishlatiladigan markazdan qochma tezligi

Santrifüj tezligi odatda 4000 rpm (3000 g odatda tavsiya etiladi va maksimal 4000 g dan oshmasligi kerak). 5-8 daqiqa davomida santrifüjlangandan so'ng, 4 ml namunani 1 ml dan o'nlab mikrolitrgacha konsentratsiyalash mumkin; Tezlik juda yuqori bo'lsa, maqsadli protein tushadi, natijada maqsadli protein yo'qoladi; Past tezlik, vaqt talab qiluvchi va past ish samaradorligi;

7. Qurol boshi ultrafiltratsiya trubasiga cho'zilganida ehtiyot choralari

Ultrafiltratsiya trubasiga protein eritmasi yoki tampon qo'shilganda, ko'k qurol boshi ishlatilishi mumkin; Biroq, konsentrlangan maqsadli oqsil ultrafiltratsiya trubasining pastki qismidan so'rilsa, sariq qurol boshini ishlatish kerak; Qurol boshi ultrafiltratsiya trubasiga kiritilganda, filtr membranasini teshmaslik uchun filtr membranasiga tegmasligi kerak;

8. Ultrafiltratsiya trubasining oqsil adsorbsiyasi yo'qolishini kamaytiring

Ultrafiltratsiya naychasining membranasi oqsilni adsorbsiyalashi mumkin, bu maqsadli oqsilni taxminan 30 foizga kamaytiradi; Protein yo'qotilishini kamaytirish uchun maqsadli protein eritmasini singdirgandan so'ng, filtr membranasi tomonidan adsorbsiyalangan oqsilning ko'p qismini yuvish va maqsadli oqsilning yo'qolishini kamaytirish uchun ultrafiltratsiya trubasining pastki qismini oqsil tamponi bilan tozalang; Agar tozalangan protein konsentrlangan bo'lsa, konsentrlangan hajm juda kichik bo'lmasligi kerakligiga e'tibor bering; Odatda, qanchalik santrifüjlangan bo'lishidan qat'i nazar, quyida taxminan 200 mkL protein eritmasi saqlanib qoladi;

9. Ultrafiltratsiya trubasining ishdan chiqishi qanday aniqlanadi

Oddiy foydalanishda, filtr membranasi teshilmaganda, konsentrlangan oqsil eritmasida protein mavjud emas yoki miqdori juda kam (maqsadli oqsilni o'z ichiga oladi), birinchi filtrlangan eritmada maqsadli protein mavjud bo'lsa, bu filtr membranasining yaroqsizligini va yangi ultrafiltratsiya trubkasi bilan almashtirilishi kerak.