Virus kabi zarrachalar vaktsinasi va uni quyida tushirish jarayoni
Virus kabi zarrachalar (VLP) vaktsinasi virus tuzilishiga asoslangan vaktsina texnologiyaidir, ammo virusli genetik materiallar mavjud emas. Ular axloqiy viruslarning morfologiyasi va sirtli antijenlarini taqqoslash orqali ular kuchli immunitetga qarshi javobni rag'batlantiradilar va ularning ko'payishining iloji borligi sababli ko'proq xavfsizlikni kuchaytiradi. VLP vaktsinalar an'anaviy vaktsinalar uchun yaxshiroq alternativa (jonli va faollashtirilgan). VLP vaktsinasi tanada ko'paytira olmaydi, shuning uchun hamma uchun, shu jumladan homilador ayollar yoki immunitet tizimlari buzilganlar uchun mos keladi. Bundan tashqari, gripp viruslari, afrikalik ot kasalliklari va blueteue viruslari kabi, bu kabi gripp viruslari va Bluetoneue viruslari kabi, viruslar va BluetongePeue viruslari kabi, viruslar va bluetdant viruslari bilan. Ikkinchidan, VLPS real viruslar tarkibiga, ichki protuzlar tarkibiga taqlid qila oladi, ammo tarkibiy oqsillar inaktivatsiya paytida o'zgarishi mumkin, natijada immunogen zaiflik paydo bo'ladi.
ANJIR. 1. VLPS va Chimer VLP-ning shakllanishi mexanizmi
VLP vaktsinasi xususiyatlari
1
2. Iftiyozsiz: virusli genom mavjud emas, ko'payolmaydi yoki kasalliklarga olib kelmaydi.
3 Antibodlar va hujayralar immunitetini (masalan, OIV, HPV vaktsinalar) zararsizlantirishi mumkin.
4
ANJIR. 2. Mavjud VLP vaktsinalar
VLP vaktsinalarni ishlab chiqarish tizimi
VLPS turli xil ifoda tizimlari orqali ishlab chiqarilishi mumkin, umumiy platformalar quyidagilardan iborat:
1. Hasharot uyali-Baculovirus tizimi:
Afzalliklari: yuqori hosil, past narx, murakkab oqsilni yig'ish uchun mos keladi.
Ilova: HPV vaktsinasi, ebola vaktsinasi.
2. Sutemizuvchi hujayralar (masalan, HEK293 hujayralari):
Afzalliklari: Tartibga soluvchi o'zgartirishlar odamlarga yaqin va VLPS (gripp va emlashlar kabi).
3. Xamirturush tizimlari (masalan, pixia pastoris):
Afzalliklari: tez, arzon narxlar, gepatit b vaktsinasida ishlatilgan.
4. O'simlik tizimlari (masalan, tamaki xloroplastlar):
Ekologik toza va tarqalish, rivojlanish bo'yicha (masalan, Norovirus VLP vaktsinasi).
VLP vaktsinasi pastligi
VLPS ifoda tizimining xilma-xilligi pasayib ketgan tozalash jarayonlarining o't jihatidan olib keladi.
ANJIR. 3 pastga tushirish oqimi jadvali
Hosil va aniqlashtirish:
Har qanday madaniyat muhitida, hujayra madaniyati bo'yicha ekspluatatsiyani, shuningdek, madaniyat muhiti, shuningdek, madaniyatli vositalar, metabolik mahsulotlar va yarim bulutli, shuningdek, konsentratsiya tugatilmasa va ultrafiltratsiya membranasi parchalansa. Shuning uchun u kontsentratsiyadan oldin, konsentratsiyadan oldin aniqlanishi kerak, shunda u shaffof yoki shaffof vositalarning kontsentratsiyasi kontsentratsiya jarayonini normallashtirishi va ultrafatatsiya membranasining xizmatini ta'minlaydi. Madaniyat yechimi kontsentratsiyasining konsentratsiyasi konsentratsiya jarayonida muhim texnik aloqa hisoblanadi.
Samarali aniqlik jarayoni qattiq zarralar, yuqori mahsulotning yuqori hosildorligi, oson hajmini oshirish va quyi oqimlardan himoya qilish uchun yuqori darajadagi quvvat uyg'unligini talab qiladi.
Usul
Centrifulation: farqli san'ati katta zarralarni olib tashlaydi.
Chuqur filtr: Multek Filtrdan foydalaning (masalan, 1,2 mkm → 0 {0). 45 mm.
Tangensial oqim filtratsiyasi (TFF): Ommaviy ishlab chiqarish uchun javob beradi, namunalarni jamlaydi va nopokliklarning mayda zarralarini olib tashlaydi.
Ammo, etishtirish shkalasi juda katta, santrifüj uzoq vaqt talab etilsa, ko'plab chuqur filtr membranalar talab qilinadi, shuning uchun sarflangan materiallar narxi sezilarli darajada oshadi. Shu bilan birga, hujayra madaniyatining yuqori zichligi chuqur filtr membrana yukini kamaytiradi, natijada xarajatlar va ortiqcha mahsulotni suyultirish.
TFF membranasi tarkibiy qismlari mavjud: tekis kasseta va ichi bo'sh tola. Tangensial oqim filtratsiyasi (TFF) uzatma bosimining farqi bilan boshqariladi. Membranadagi g'ovakdan kichik bo'lgan moddalar va iflosliklar membranadan o'tib ketadi, masalan, kattaroq zarralar bo'lgan hujayralar kabi iflosliklar tuziladi. Mikrofiltratsiya uchun ishlatiladigan membrananing g'ovak hajmi 0 0}}}}}}}. 45/0,22 mkm. Bo'sh birlik tolasi to'g'ridan-to'g'ri qattiq tarkibiy suyuqlikni to'g'ridan-to'g'ri aylantirishi mumkin, masalan, markazdan tashqari parametrlar va operatsion ishlarni modulli avtomat ishlab chiqarish talablariga muvofiq ravishda tozalash va operatsion xarajatlarni qayta-qayta tozalash, kamaytirish.
Ultrafiltratsiya kontsentratsiyasi (TFF):
Maqsad: xromatografik davolanish miqdorini kamaytirish, xromatografik samaradorlikni yaxshilash va xromatografik ustunni himoya qilish.
Umuman olganda, ultrafiltratsiya (TFF) vlp 100 martadan ko'proq va heteropreminning olib tashlanishi 99 foizga yetishi mumkin. Ular orasida ichi bo'sh tolali membrana filtratsiyasi texnologiyasi engil va kam silthli kuchning afzalliklariga ega, uni vilkali va eng arzon va qulay kuchaytirishning afzalliklariga ega, shuning uchun konsentratsiyalangan va tozalangan vlp uchun ichi bo'sh tolasini tanlash tavsiya etiladi.
Ultrafiltratsiya usuli konsentratsiya va tozalash uchun ishlatiladi, bu to'g'ridan-to'g'ri konsentratsiyaning samaradorligi va sifatini belgilaydigan o'ng membrananing yuqori qismini tanlash juda muhimdir. Bir tomondan, hosildorlikni ta'minlash uchun maqsadli molekulalarni tuzatish uchun membrana molekulalarini samarali tuzatish uchun ekstraktni tanlash kerak. Shuning uchun, maqsad molekulasini tuzatadigan eng katta printsip - membranani tanlash va filtr membranani bir xil o'lchamdagi taqsimlash bilan tanlashga harakat qiling.
Birlamchi tozalash:
1. Yog'ingarchilik usuli
Polietilen glikol (qoziq) Yog'ingarchilik: VLPSning tanlangan yog'inlari, qobilish va poklikni muvozanatlash uchun optimallashtirilgan konsentratsiya va tuz konsentratsiyasini talab qiladi.
2. Xromatografiya
Yomon xromatografiya:
Geparin yaqinligi: sirtli zaryadning VLPS xususiyatlaridan foydalanish (masalan, HPV VLP).
Antiborni qo'shish Xromatografiya: Yuqori o'ziga xoslik, ammo qimmat.
ION birja xromatografiyasi (IEX): ANION BIRINCHILANUVCHI (masalan, Sst ustuni) yoki Case, SP ustunini tanlang.
Noma'lum xromatografiya xromatografiyasi (HIC): Ba'zi bir to'qishmaydigan VLPS uchun javob beradi.
Yaxshi tozalash:
Molekulyar istisno xromatografiyasi (sek, gel filtratsiyasi):
Bufer almashtirish bilan birga qoldiq oqsillar, nuklein kislotalar yoki agregatlarni olib tashlash. Yuqori aniqlik, ammo past oqim, ko'pincha oxirgi tozalash bosqichi sifatida ishlatiladi.
Ko'p rejim xromatografiyasi:
Masalan, ion almashinuvi va molekulyar elak effekt bilan birlashtirilgan Capto-ning qatllari, bir qadamda turli xil nopokliklarni olib tashlashi mumkin.
Virus inaktivatsiya / yadro kislotasi olib tashlash (agar kerak bo'lsa):
Nuklizatsiyani davolash: masalan, Benzonase Degrad Xost DNK / RNA.
UF / df: nuklein kislotalar va fermentlarning mayda bo'laklarini olib tashlash uchun TFF tizimini muvofiqlashtirish tizimi.
Konsentratsiya va tayyorgarlik:
Tangensial oqim filtratsiyasi (TFF):
Tafakkurlarni boshqacha joylashtirishda diqqatni yo'naltirishni (masalan, pbalar yoki shakllantirish tamponlari).
Steril Filtratsiya:
0. 22 [mbbrana filtratsiyasi bepushtlikni ta'minlaydi.
Oddiy holat
Quyida vlp vaktsinalar uchun quyi oqim tozalanish jarayonlari.
Hidlash haqida
Gidlling texnologiyasi - bu ishlab chiqarish yo'naltiriladigan va yuqori texnologiyali korxona, shuningdek, quyi oqim, biofarmasevitallarni ajratish va tozalashga qaratilgan yuqori texnologiyali korxona. Mahsulotlar MAB, VASINES, diagnostika, qon mahsulotlari, sarum, endotoksin va boshqa biologik mahsulotlarning filtrlash jarayonida keng qo'llaniladi; Gipling texnologiyasi "Kasettlar filtrli filtrlash moslamasi", "Tilli oqim" filtri, "Sterilizatsion filtri", "Sterilizatsion filtri", "Steriliza filtri", "Steriliza filtri", "Sterilizatsion filtri", "Steriliza filtrlash moslamalari", "sterilus filtri", "Sterilizatsion filtr" filtri. Gipling Technology Siz bilan hamkorlik qilishni kutmoqda!